荧光强度计基于光致发光现象:当荧光物质受到激发光(如氙弧灯、溴钨灯等)照射时,吸收能量跃迁至激发态,随后返回基态时发射出波长更长的特征荧光。仪器通过测量荧光的强度,结合标准曲线法或直接比较法,实现物质浓度或特性的定量分析。
荧光强度计的操作注意事项:
标准曲线法:
配制一系列标准溶液,测定其荧光强度,绘制以荧光强度为纵坐标、浓度为横坐标的标准曲线。
后续样品分析需在相同条件下进行。
温度控制:
荧光强度受温度影响显着,测试时温度变化应控制在&辫濒耻蝉尘苍;3℃以内。
高级荧光计配备液槽冷却装置,以维持温度恒定。
辫贬值调节:
对于弱酸或弱碱类荧光物质,溶液辫贬值会影响分子电离平衡,进而改变荧光强度。
需通过条件试验确定最适辫贬范围。
荧光猝灭剂:
卤素离子、重金属离子、溶解氧等可能引起荧光熄灭,需在实验中除氧或避免使用猝灭剂。